Evaluación de métodos de fraccionamiento y de almacenamiento de colectas de sangre de cordón umbilical para trasplante alogénico aplicables al desarrollo de bancos

Résumé

El objetivo tirncipal de la Tesis es la elección de un método conjunto de fraccionamiento y almacenamiento de la sangre de cordón umbilical para su aplicación a gran escala. Para ello se comparan el método de concentración celular mediante hidroxietilalmidón (HES) usado tradicionalmente para fraccionar médula ósea y dos métodos de separación de células mononucleadas con Ficoll y Percoll. Se evalúa la criopreservación en tubo para todas las unidades fraccionadas y se estandarizan las condiciones de criopreservación en bolsas de volumen pequeño (50 ml.) con un sistema específico de placas y gradillas, diseñado comercialmente durante la realización del estudio que se aplica a las unidades fraccionadas de mayor volumen, las del método de HES. El uso de bolsas permite procesar las unidades en sistemas cerrados, aunque requiere más espacio de almacenamiento que la cripreservación en tubos. El método de HES ha resultado significativamente más eficaz que los otros dos métodos en la recuperación de células y progenitores y menos en la reducción de volumen y hematíes. La criopreservación en tubos y bolsas ha dado lugar a una recuperación adecuada de células viables y progenitores. El coste del fraccionamiento es mucho menor con el método de HES que con los otros dos métodos y, para un Banco de 5.000 unidades, sería capaz de compensar respecto a ellos su coste mucho mayor de almacenamiento y el de nitrógeno líquido de mantenimiento, durante un número de años que variaría en función del tipo de vial criogénico utilizado. En conclusión, el fraccionamiento con HES y la criopreservación en bolsas de 50 ml. son los métodos de elección en términos de coste-eficacia y garantías biológicas..